分子生物学实验技术

《分子生物学实验技术》内容涵盖三个方面：一是基本实验技术，二是基因工程蛋白质药物工程化生产技术，三是现代分子生物学功能实验技术。本书包括基本分子生物学实验技术，并将常用分子生物学方法、科研成果和基因工程药物生产实践融入实验教学中，培养学生分子生物学实验技能、科研创新及工程产业化能力，实用性和指导性强。本书可以用作生物技术、生物工程、制药工程、生物医学工程等相关专业本科教材，也可供上述领域研究人员参考。

刘长霞，北京化工大学生命科学与技术学院，博士。长期从事分子生物学实验教学及科研工作，具有丰富的教学经验。罗施中，北京化工大学生命科学与技术学院，副院长。主要从事生物化工和化学生物学的相关研究工作。发表论文三十多篇，参编专著一本。荣获2013年北京市科技新星，2013年北京市科学技术奖（三等奖。

第1章　核酸分离提取技术1引言1第1节碱裂解法提取质粒DNA1第2节磁珠法提取质粒DNA4第3节质粒DNA琼脂糖凝胶电泳及其胶回收7第4节E.coli基因组DNA的提取10第5节RNA的分离提取14参考文献18第2章　PCR及实时荧光定量PCR技术19引言19第1节DNA序列的PCR扩增19第2节实时荧光定量PCR技术测定目标DNA含量24参考文献40第3章　基因工程菌的构建与表达产物鉴定技术41引言41第1节E.coli感受态细胞的制备、质粒DNA重组与转化41第2节SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质45第3节蛋白质的Western印迹分析50参考文献56第4章　基因工程蛋白的工程化生产技术57引言57第1节基因工程蛋白的原核表达工程化技术58第2节原核表达基因工程蛋白的分离纯化68第3节基因工程蛋白的真核表达工程化技术75第4节真核表达基因工程蛋白的分离纯化82参考文献88第5章　基因定点突变、基因敲除及微生物分子生物学鉴定技术89引言89第1节基因定点突变技术89第2节基于RecA同源重组的基因敲除技术94第3节基于16SrRNA序列分析等相关技术鉴定微生物107参考文献119第6章　蛋白质双向电泳、质谱鉴定及结晶技术120引言120第1节蛋白质双向电泳120第2节蛋白质的质谱鉴定131第3节蛋白质表达、纯化与结晶138参考文献151第7章　生物信息学网络资源利用152引言152第1节生物信息数据库152第2节核酸与蛋白质序列分析158参考文献163附录164附录Ⅰ实验报告撰写方法164附录Ⅱ实验室安全守则165附录Ⅲ培养基与试剂配制166

近年来，随着分子生物学的发展及其与其他学科的交叉、融合，分子生物学实验技术已成为生命科学、工程（特别是生物工程、制药工程及环境工程）等学科领域的核心和的实验技术。《分子生物学实验技术》内容主要包括：服务于教学的基本实验技术，含核酸提取分离技术、PCR技术、基因重组与工程菌构建技术、表达产物分析鉴定技术等；服务于生产实践的工程化生产技术，涉及通过代表性的原核生物（E.coli）表达系统、动物细胞（CHO）表达系统及其分离纯化技术生产基因工程蛋白药物，为基因工程产业化提供借鉴；广泛应用于现代科学研究的重要技术，如实时荧光定量PCR技术，基因定点突变、基因敲除及微生物分子生物学鉴定技术，基因工程蛋白的双向电泳、质谱鉴定及结晶技术，生物信息学网络资源利用等。参编人员为从事相关教学与科研工作的教师以及基因工程蛋白质药物生产与研究的一线工程技术人员，他们将科研成果和工程实践融入实验教学工作，培养学生的基本素质、科研创新及工程产业化能力。本书是一本实用性较强的分子生物学实验教科书，适用于生物技术、生物工程、制药工程、生物医学工程等专业的本科教材，也可供上述领域科研及工程研究人员参考，旨在为创新人才培养、科学研究、产学研、科研成果产业化提供参考。向各位参编人员及其他为本书撰写过程中提供帮助的人员表示衷心的感谢！由于编者水平所限，书中不足之处在所难免，恳请读者和同行多提宝贵意见。编者2017年12月于北京