描述
开 本: 16开纸 张: 胶版纸包 装: 平装-胶订是否套装: 否国际标准书号ISBN: 9787562188407
内容简介
“普通植物病理学实验实习”主要是配合“普通植物病理学”的教学内容,帮助学生理解和掌握植物病理学的基础理论,学习基本知识和基本技能的实验指导课程。该内容以前是“普通植物病理学”的实验教学部分。为了加强对学生实践与创新能力的培养,突出学生个性化发展,本科生教学计划调整之后的“普通植物病理学”的实验和教学实习部分被独立作为一门必修课,总学时由原来的54学时,调整为94学时(其中实验54学时,教学实习1。5周),并且由原来的期课改为年课。
《普通植物病理学实验实习指导》编写的指导思想是在培养植物病理学基本操作技能的基础上,以提高学生的实践能力、设计能力和分析问题能力为重点。为此,所选实验内容上除了传统普通植物病理学实验的植物病原物形态观察、验证性实验外,还加入了学生自己动手完成植物病害发生、发展过程相关环节的实验,同时设计了若干个综合性和设计性实验。
《普通植物病理学实验实习指导》共有23个实验和6个教学实习,包含植物病害症状类型观察,各类病原物的形态观察,病原物的分离、培养、接种、致病过程观察,病原物致病性分化和寄主抗病性鉴定,病原物的生理生化特性,植物病害的调查、诊断与鉴定,植物病害标本的采集与制作,植物病害的流行与防治等经典的植物病理学实验及研究技术,着重训练学生的基本操作技能。同时,加入了现代植物病理学的实验技术手段,如PCR技术、植物病原检索鉴别计算机辅助系统的应用等相关内容,以培养学生适应现代植物病理学发展的要求。总体来说,《普通植物病理学实验实习指导》降低了观察性实验课时的比例,提高了操作技能训练实验课时的比例,同时还加入了综合性、设计性实验。在具体实验教学中,可以根据教学条件和学生的兴趣选择相关的实验内容进行教学。
《普通植物病理学实验实习指导》编写的指导思想是在培养植物病理学基本操作技能的基础上,以提高学生的实践能力、设计能力和分析问题能力为重点。为此,所选实验内容上除了传统普通植物病理学实验的植物病原物形态观察、验证性实验外,还加入了学生自己动手完成植物病害发生、发展过程相关环节的实验,同时设计了若干个综合性和设计性实验。
《普通植物病理学实验实习指导》共有23个实验和6个教学实习,包含植物病害症状类型观察,各类病原物的形态观察,病原物的分离、培养、接种、致病过程观察,病原物致病性分化和寄主抗病性鉴定,病原物的生理生化特性,植物病害的调查、诊断与鉴定,植物病害标本的采集与制作,植物病害的流行与防治等经典的植物病理学实验及研究技术,着重训练学生的基本操作技能。同时,加入了现代植物病理学的实验技术手段,如PCR技术、植物病原检索鉴别计算机辅助系统的应用等相关内容,以培养学生适应现代植物病理学发展的要求。总体来说,《普通植物病理学实验实习指导》降低了观察性实验课时的比例,提高了操作技能训练实验课时的比例,同时还加入了综合性、设计性实验。在具体实验教学中,可以根据教学条件和学生的兴趣选择相关的实验内容进行教学。
目 录
植物病理学实验室守则
普通植物病理学实验
实验一 植物病害症状观察
实验二 显微镜的使用和临时病原玻片的制作
实验三 植物病原真菌的形态观察
实验四 植物病原壶菌、接合菌的识别与鉴定
实验五 植物病原子囊菌的识别与鉴定
实验六 植物病原担子菌形态特征的比较与生活史观察
实验七 植物病原有丝分裂孢子真菌鉴别特征观察比较
实验八 植物病原根肿菌、卵菌形态观察及霜霉目鉴定
实验九 植物病原真菌的分离纯化技术
实验十 植物病原真菌ITS的检测与鉴定
实验十一 植物病原细菌的分离纯化技术
实验十二 植物病原细菌革兰氏染色
实验十三 植物病原细菌鞭毛染色
实验十四 植物病原细菌16SrDNA的检测与鉴定
实验十五 植物病毒病的症状观察及病毒内合体检查
实验十六 植物病毒的接种方法
实验十七 植物线虫的分离方法及形态观察
实验十八 寄生性种子植物及寄生关系的一般特征
实验十九 植物病程观察
实验二十 植物病原菌孢子萌发的测定与应用
实验二十一 植物病原菌的致病力差异测定
实验二十二 寄主植物的抗病性鉴定
实验二十三 种子检验及种子处理
普通植物病理学教学实习
实习一 植物病害的田间调查
实习二 植物病害标本的采集、制作及保存
实习三 植物病害田间诊断和鉴定
实习四 显微计测与显微描绘
实习五 培养基、棉塞的制作及灭菌操作
实习六 柯赫氏法则证病实验
附录 植物病理学实验常用培养基配方
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《普通植物病理学实验实习指导》:
(二)实验方法
1.线虫病害症状观察
观察蔬菜根结线虫病、小麦粒线虫病、水稻秆尖线虫病、黄麻根结线虫病标本,注意根部、茎、叶、种子等的变化。
2.线虫形态的观察
观察蔬菜根结线虫,用解剖针轻轻拨开根瘤病组织,可见组织中有乳白色发亮的小颗粒——根结线虫的雌虫,用解剖针将雌虫挑出放于载玻片上,加1滴蒸馏水,盖上盖玻片,在低倍镜下观察虫体形态。
用解剖针挑取组织中的线虫,置于载玻片上并盖片,后用橡皮或挑针轻轻压盖玻片,镜检,观察植物线虫的生殖系统及消化系统。
雌虫体为洋梨形,具有一长颈,头部前端为口腔,内有一吻针,后是膨大的基部球,具明显的中食道球。虫体膨大的部位是腹部,后端为肛门,在腹部常能看到卵巢,卯囊是附在腹部末端的一个囊袋,内有若干卵,卯长圆形、无色,有的卵内可见已开始分化和形成的幼虫。
3.线虫漏斗分离法
该方法操作简单,是目前从植物材料中分离线虫较好的方法。它利用线虫的趋水性,使游离到水中的线虫沉积在漏斗的底部,从而将其收集。
(1)将玻璃漏斗架在漏斗架上,漏斗下面接10cm橡皮管,橡皮管上装1个止水夹。
(2)将寄主组织洗净后,称20g切碎,用纱布包好,在漏斗中浸泡24h,线虫从寄主组织或土壤中游出,穿过纱布沉落在漏斗底部的橡皮管里。
(3)打开止水夹,把橡皮管里的水收集到培养皿中。
(4)镜检分离到的线虫。
4.线虫过筛分离法
此方法适合分离土壤中的线虫。利用线虫的趋水性,使线虫悬浮在水中,用筛网将线虫与土壤分开,并从水中分离出线虫。
(1)将土壤充分捣碎,混合均匀。
(2)取其中250g置于小塑料桶中,加水700-1000ml),充分搅动使土壤分散。
(3)沉降10s后,将上面的悬浮液通过60网目的筛子,过滤在第二个小塑料桶中,将60网目筛子上的残余物和个小塑料桶桶底的泥沙,用水冲洗弃掉。
(4)将第二个小塑料桶中的液体按顺序依次通过100、200、325网目的网筛,3个筛子上的残余物分别洗在3个容量为250mL的烧杯中。
(5)镜检325目网筛过滤后溶液中的线虫。
(三)注意事项
1.在分离得到的线虫中可能有寄生和腐生的线虫,镜检时要注意区分。
2.若线虫数量太少,可将水样倒入离心管中,在离心机中1500r/min离心3min,倒掉上层清水,将下层沉淀物重悬浮后倒入培养皿中再镜检。
……
(二)实验方法
1.线虫病害症状观察
观察蔬菜根结线虫病、小麦粒线虫病、水稻秆尖线虫病、黄麻根结线虫病标本,注意根部、茎、叶、种子等的变化。
2.线虫形态的观察
观察蔬菜根结线虫,用解剖针轻轻拨开根瘤病组织,可见组织中有乳白色发亮的小颗粒——根结线虫的雌虫,用解剖针将雌虫挑出放于载玻片上,加1滴蒸馏水,盖上盖玻片,在低倍镜下观察虫体形态。
用解剖针挑取组织中的线虫,置于载玻片上并盖片,后用橡皮或挑针轻轻压盖玻片,镜检,观察植物线虫的生殖系统及消化系统。
雌虫体为洋梨形,具有一长颈,头部前端为口腔,内有一吻针,后是膨大的基部球,具明显的中食道球。虫体膨大的部位是腹部,后端为肛门,在腹部常能看到卵巢,卯囊是附在腹部末端的一个囊袋,内有若干卵,卯长圆形、无色,有的卵内可见已开始分化和形成的幼虫。
3.线虫漏斗分离法
该方法操作简单,是目前从植物材料中分离线虫较好的方法。它利用线虫的趋水性,使游离到水中的线虫沉积在漏斗的底部,从而将其收集。
(1)将玻璃漏斗架在漏斗架上,漏斗下面接10cm橡皮管,橡皮管上装1个止水夹。
(2)将寄主组织洗净后,称20g切碎,用纱布包好,在漏斗中浸泡24h,线虫从寄主组织或土壤中游出,穿过纱布沉落在漏斗底部的橡皮管里。
(3)打开止水夹,把橡皮管里的水收集到培养皿中。
(4)镜检分离到的线虫。
4.线虫过筛分离法
此方法适合分离土壤中的线虫。利用线虫的趋水性,使线虫悬浮在水中,用筛网将线虫与土壤分开,并从水中分离出线虫。
(1)将土壤充分捣碎,混合均匀。
(2)取其中250g置于小塑料桶中,加水700-1000ml),充分搅动使土壤分散。
(3)沉降10s后,将上面的悬浮液通过60网目的筛子,过滤在第二个小塑料桶中,将60网目筛子上的残余物和个小塑料桶桶底的泥沙,用水冲洗弃掉。
(4)将第二个小塑料桶中的液体按顺序依次通过100、200、325网目的网筛,3个筛子上的残余物分别洗在3个容量为250mL的烧杯中。
(5)镜检325目网筛过滤后溶液中的线虫。
(三)注意事项
1.在分离得到的线虫中可能有寄生和腐生的线虫,镜检时要注意区分。
2.若线虫数量太少,可将水样倒入离心管中,在离心机中1500r/min离心3min,倒掉上层清水,将下层沉淀物重悬浮后倒入培养皿中再镜检。
……
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