生物化学与生物分子实验指导

实验须知
生物化学实验基本操作训练
部分  常用生物化学与分子生物学技术及原理
　第1章  分光光度法
　  1.1  基本原理
　  1.2  分光光度法的定性和定量分析
　  1.3  分光光度计的结构
　第2章  层析技术
　  2.1  离子交换色谱法
　  2.2  凝胶过滤色谱法
　  2.3  吸附层析法
　  2.4  分配色谱法
　  2.5  亲和层析法
　第3章  电泳技术
　  3.1  基本原理
　  3.2  一般技术
　  3.3  聚丙烯酰胺凝胶电泳法
　  3.4  蛋白质的凝胶聚焦电泳法
　第4章  离心技术
　  4.1  基本原理
　  4.2  离心机和转子的种类
　  4.3  离心分离的种类
　第5章  分子生物学基本原理
　  5.1  基本概念
　  5.2  重组DNA技术
　第6章  生化实验常用仪器
　  6.1  722型分光光度计
　  6.2  精密pH计
　  6.3  高速离心机
　  6.4  PCR基因扩增仪
第二部分  生物化学与分子生物学实验
　第7章  蛋白质定性定量分析
　  实验一  蛋白质的沉淀反应
　    1.蛋白质的盐析
　    2.用重金属盐沉淀蛋白质
　    3.用沉淀生物碱的试剂沉淀蛋白质
　    4.用无机酸沉淀蛋白质
　    5.用有机酸沉淀蛋白质
　    6.加热沉淀蛋白质
　  实验二  蛋白质的两性反应及等电点测定
　    1.蛋白质的两性反应
　    2.酪蛋白的等电点的测定
　  实验三  Bradford法测定蛋白浓度
　  实验四  血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定
　  实验五  微量凯氏定氮法测定血清总蛋白
　  实验六  蛋白质定量的紫外分光光度法
　  实验七  福林一酚试剂法测定血清总蛋白
　  实验八  用离子交换层析法分离混合氨基酸
　  实验九  凝胶过滤分离高铁血红蛋白与高铁氰化钾
　  实验十  凝胶过滤分离纯化脲酶及其活性测定
　  实验十一  血清γ球蛋白的分离与纯化
　  实验十二  醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质
　  实验十三  聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质
　  实验十四  凝胶等电聚焦分离血清蛋白质
　第8章  核酸定性定量分析
　  实验十五  酵母RNA的提取(浓盐法)及成分鉴定
　  实验十六  核酸的定量测定——定磷法
　第9章  酶学实验
　    1.酶活力
　    2.初速度
　  实验十七  底物浓度及抑制剂对酶促反应速度的影响
　  实验十八  温度、pH对酶促反应速度的影响
　  实验十九  蔗糖酶与淀粉酶的专一性实验
　  实验二十  乳酸脱氢酶及其辅酶的作用实验
　  实验二十一  乳酸脱氢酶同工酶活性测定
　  实验二十二  丙酮酸脱氢酶活性测定
　  实验二十三  糖原合成酶活性测定
　第10章  代谢实验
　  实验二十四  还原糖的定量测定
　    1.Somogyl-shaffer-Hartmann法定糖
　    2.比色法定糖
　  实验二十五  肝糖原的提取和鉴定
　    1.肝糖原提取
　    2.鉴定
　  实验二十六  粗脂肪的定量测定——索氏提取法
　  实验二十七  脂肪皂化值及碘值的测定
　    1.脂肪皂化值的测定
　    2.脂肪碘值的测定
　  实验二十八  脂肪酸的B-氧化
　  实验二十九  肝组织的生酮作用
　  实验三十  转氨基作用及其鉴定
　第11章  分子生物学实验
　  实验三十一  外周血白细胞DNA提取(微量法)
　  实验三十二  琼脂糖凝胶电泳
　  实验三十三  大肠埃希菌质粒转化实验
　  实验三十四  微量快速质粒DNA的提取与纯化(碱裂解法)
　  实验三十五  限制性核酸内切酶消化DNA
　  实验三十六  从琼脂糖凝胶中回收DNA片段(低熔点胶法)
　  实验三十七  质粒的柱层析纯化
　  实验三十八  聚合酶链反应
　  实验三十九  单链构象多态性分析
　    1.10%聚丙烯酸胺凝胶的制备
　    2.电泳
　    3.银染
　    4.凝胶干燥
　第12章  临床生化实验
　  实验四十  酶法(GOD-PAP法)测血清葡萄糖
　  实验四十一  血清尿素氮的测定
　  实验四十二  血清甘油三酯测定
　  实验四十三  红细胞膜的制备
　  实验四十四  红细胞膜蛋白质含量测定(改良福林-酚试剂法)
　  实验四十五  红细胞膜总胆固醇含量的测定
　  实验四十六  维生素C含量的测定(碘滴定法)