细胞生物学实验技术教程（第五版）

生命科学已经进入教材爆炸式增长时期。在坚持全员全过程全方位育人的背景下，《细胞生物学实验技术教程（第五版）》在第四版的基础上，补充更新了实验，整合成7章共66个实验。**章为基础细胞生物学实验，第二章到第六章涵盖了高级细胞生物学实验、植物转基因技术及检测、线虫的实验操作、果蝇的实验操作及动物细胞的实验操作，第七章立足于对学生综合创新能力的培养，收录了*都师范大学参加全国大学生生命科学竞赛获得一等奖的实验论文。《细胞生物学实验技术教程（第五版）》的撰写力求贯彻习近平总书记的要求“广大青年科技人才要树立科学精神、培养创新思维、挖掘创新潜能、提高创新能力，在继承前人的基础上不断超越。”培养学生沿着求知问学，沿着求真理、悟道理、明事理的方向前进，并引导学生培养综合能力，培养创新思维。《细胞生物学实验技术教程（第五版）》前六章均有实验目的、实验原理、结果分析及思考题等，并以二维码形式增加了彩图、拓展阅读、视频等数字资源。文前附加了教学课件申请单。

目录
第五版前言
**章　基础细胞生物学实验1
实验1.1　细胞膜的渗透性1
实验1.2　细胞的凝集反应3
实验1.3　花粉粒活性染色鉴定5
实验1.4　叶绿体和细胞核的密度梯度分离7
实验1.5　细胞器的超活染色观察9
实验1.6　植物细胞骨架的光学显微镜观察11
实验1.7　果蝇诱捕和巨大染色体的观察13
实验1.8　孚尔根染色法14
实验1.9　血涂片的制备与显微观察16
实验1.10　植物原生质体的制备及瞬时转化17
实验1.11　植物细胞质膜的分离和纯化技术19
实验1.12　质膜蛋白分选的膜泡运输观察20
实验1.13　植物细胞程序性死亡的诱导和梯状DNA的观察23
第二章　高级细胞生物学实验26
实验2.1　氯化汞对水通道蛋白的抑制效应观察26
实验2.2　核酸（DNA和RNA）的细胞核定位观察28
实验2.3　微丝骨架的特异性标记30
实验2.4　微管骨架的荧光显微标记实验32
实验2.5　线粒体的特异性荧光标记观察34
实验2.6　GFP-tubulin转基因拟南芥的无菌培养及观察35
实验2.7　流式细胞仪观察细胞周期37
实验2.8　植物细胞胞吞作用及内膜系统的荧光显微镜观察39
实验2.9　Taq酶的提取、分离纯化及酶制剂的制备42
实验2.10　木瓜蛋白酶的提取、活性测定及固定化44
实验2.11　酵母双杂交实验47
实验2.12　酵母单杂交实验49
实验2.13　凝胶阻滞实验51
实验2.14　双分子荧光互补技术55
第三章　植物转基因技术及检测59
实验3.1　多肉植物的无菌培养59
实验3.2　小麦成熟胚愈伤组织诱导60
实验3.3　根癌农杆菌介导的烟草叶盘法遗传转化61
实验3.4　根癌农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化64
实验3.5　发根农杆菌介导的大豆毛状根转化65
实验3.6　基因组DNA的提取67
实验3.7　植物组织总RNA的提取68
实验3.8　核酸浓度和纯度检测71
实验3.9　逆转录PCR实验74
实验3.10　real-time PCR实验76
实验3.11　Southern印迹杂交实验78
实验3.12　萤光素酶报告基因的检测82
第四章　线虫的实验操作84
实验4.1　线虫DNA的提取84
实验4.2　线虫同步化85
实验4.3　线虫总RNA提取86
实验4.4　线虫的甲基磺酸乙酯（EMS）诱变87
实验4.5　线虫的杂交88
实验4.6　线虫基因型的鉴定89
实验4.7　线虫转基因及整合90
实验4.8　线虫的RNAi实验91
实验4.9　利用CRISPR/Cas9对线虫的基因组进行编辑92
第五章　果蝇的实验操作94
实验5.1　果蝇中肠干细胞的形态与观察94
实验5.2　果蝇S2细胞的培养与转染96
实验5.3　果蝇基因组DNA的提取99
实验5.4　果蝇肠道损伤检测（蓝精灵法）101
实验5.5　果蝇精巢免疫荧光染色102
实验5.6　果蝇凋亡检测（TUNEL法）105
实验5.7　果蝇幼虫脂滴的标记观察108
第六章　动物细胞的实验操作110
实验6.1　HeLa细胞的传代培养110
实验6.2　脂质体介导的外源基因转染HeLa细胞111
实验6.3　HeLa细胞有丝分裂的形态观察113
实验6.4　免疫共沉淀技术114
实验6.5　DNA损伤诱发的焦点形成检测116
实验6.6　中性彗星实验117
实验6.7　细胞核质分离提取技术119
第七章　细胞生物学综合探究实验122
实验7.1　植物促生性芽孢杆菌缓解水稻受土壤镉胁迫的作用123
实验7.2　植物“类神经系统”传递伤害信号的探索研究129
实验7.3　哺乳动物细胞中非**的DSB末端修切途径探索135
实验7.4　跳舞草应对环境刺激产生节律性运动规律的研究141
主要参考文献147
附录150